Специфичность ферментов

Ферменты характеризуются высокой специфичностью действия, например фермент амилаза расщепляет крахмал, но 'He действует на другой углевод — сахарозу. Сахараза, наоборот, расщепляет сахарозу, но не действует на крахмал.

Специфичность действия амилазы и сахаразы

В четыре пробирки помещают:

Для этой работы используют 1%-ный раствор крахмала, 2%-ный раствор сахарозы (тростникового сахара), разбавленную слюну в качестве препарата, содержащего амилазу, и водную вытяжку из растертых с песком пекарских дрожжей в качестве препарата, содержащего сахаразу.
Пробирки встряхивают и ставят в водяную баню при 37° на 15 мин., после чего в каждую пробирку добавляют реактив Фелинга и нагревают. В пробирках № 1 и 3 появляется красный осадок закисной меди, что свидетельствует о расщеплении крахмала под действием амилазы и сахарозы под действием сахаразы. В пробирках № 2 и 4 реакция отрицательная; это показывает, что крахмал не расщепляется сахаразой, а сахароза — амилазой.
Крахмал и сахароза дают отрицательную реакцию Фелинга, так как не обладают восстанавливающими свойствами. При ферментативном гидролизе крахмала образуется дисахарид — мальтоза, при гидролизе сахарозы — моносахариды: глюкоза и фруктоза.
Мальтоза, глюкоза и фруктоза содержат свободные карбонильные группы и поэтому обладают способностью восстанавливать окисную медь, входящую в состав реактива Фелинга, в закисную медь, при нагревании образующую осадок красного цвета

Так как в пробирках № 1 и 3 реакция расщепления прошли, то образовались восстанавливающие сахара, и реакция Фелинга положительная, а в пробирках № 2 и 4 реакции расщепления не прошли, восстанавливающих веществ не образовалось, реакция Фелинга отрицательная.
Приготовление реактива Фелинга.
1) 40 г медного купороса растворяют в 1 л воды.
2) 200 г сегнетовой соли растворяют в воде при нагревании, добавляют 160 г едкого натра и охлаждают, после чего доводят водой до 1л.
Для приготовления реактива Фелинга перед употреблением смешивают равные объемы обоих растворов.